《WHO:生命体核查与解决疑虑实验参考书》上面谈到:在加热下,一般而言在 15 分钟内,骨骸显然水和,很少超过 60 分钟或更长时间。
《病理检验基本》第五版:水和较快,超过 1 小时或数小时不水和称为时间延迟水和症。
认出这里你真的一小时未水和的骨骸该如何解决疑虑吗?大多数人有可能都不真的,包括之前的我。我在丁香园论坛上面认出过关于这个疑虑的咨询,大多数人都是说没水和就那样看、那样刊。也有人说只刊 PH、量、水和时间等。
这些都不对,但是也无疑,因为书本上没有写下,老师也是这样教的。
但是《WHO:生命体核查与解决疑虑实验参考书》这本书上面就概述了关于水和时间延迟骨骸的解决疑虑,后面我们就一起来自学一下。
的水和
射到利用桶内后很快再现典型的半常温下凝胶的团块,一般而言在加热下几分钟内,开始水和(趋于稀薄),此时中都可见异质性混搭团块。随着暂时水和,趋于极为匀质和十分稀薄,在水和最后先决条件极少尚存少量的小凝团。在加热下,一般而言 15 分钟内,骨骸显然水和,很少超过 60 分钟或更长时间。如果 60 分钟仍未显然水和,可不做详细描述。在住处或适用避祸利用骨骸,当将骨骸带到实验室时,一般已经水和。
情况下水和的骨骸有可能含有不水和的胶冻状颗粒(凝胶状团块),这不表明任何病理意义。然而,黏凝胶丝的存在有可能干扰量化。
注意到 1:水和可以通过如上描述的太阳光仔细观察和显微镜完成识别。随着的水和,不坏的卵子取得社会活动的能力。如果在显微镜下仔细观察卵子不坏,则能够更长时间来完成水和过程。
注意到 2:水和期间,徙加热下或 37 摄氏度孵箱中都,在一个二维摇动器上,不断地把手混匀或旋转结果显示桶内,适度产生一个均质的骨骸。
注意到 3:如果在 30 分钟内不水和,不要开始量化,而是再到时 30 分钟。如果 60 分钟后仍未水和,按请注意到操都以解决疑虑。
水和时间延迟的解决疑虑
常常有可能不水和,这使得评估趋于吃力。在这种情况下,能够另行解决疑虑,机壳混匀或酶消化有可能是必要的。
1. 一些骨骸通过转入等重量的表征培养凝胶(如 Dulbecco 腺苷滑动东石),并且用加样器一再吹打,可使其水和。
Dulbecco’s 腺苷盐滑动凝胶:
(1)Dulbecco’s PBS:将 0.2 g (KCL),0.2 g 腺苷二氢钾(KH2P04),0.1 g 氯化镁(MgCL2.6 H2O,8.0 g 氯化钠(NaCl),2.16 g 腺苷氢二钠(NaHPO4.7 H2O)和 1.00 gD-转入到 750 ml 纯净水中都。
(2)将 0.132 g 氯化钙(CaCl2.2 H2O)溶于 10 mL 纯净水中都,边面团边较快转入上述溶凝胶中都。
(3)用 1 mmol/lNAOH 恒定 PH 至 7.4.
(4)用纯净水定容至 1000 mL。
注释: 为了防止出现沉淀,CaCl2 可不单独转入,较快转入并不断面团。
2. 一再(6~10 次)较快地通过接在试管的 18 号钝性针头(外径 0.84 mm)或 19 号针头(外径 0.69 mm), 可降低的非平滑情况下。
3. 可不用一种广谱蛋白水解酶(EC)柚子丝氨酸消化,适度无可避祸免水和。
柚子丝氨酸的准备:
用 Dulbecco 腺苷滑动东石分离出 10IU/mL 的柚子酶丝氨酸。波罗丝氨酸很难蒸发,通过面团,几乎酶可不该在 15~20 分钟内蒸发。用 10IU/mL 的柚子酶丝氨酸凝胶与等重量的(1:1)(原书为 1+1,可不该是手误)完成浓缩(1:2),用移凝胶管吸头的尖部面团,37 摄氏度孵化 10 分钟。在进一步量化之前充分混匀。
注意到:这些解决疑虑有可能影响精浆的生化、卵子气息和卵子形态,适用它们不必都以详细描述。当计算卵子浓度时,不必考虑 1:1(原电子书为 1+1,我考虑可不该是误判)转入柚子丝氨酸凝胶使按 1:2 浓缩。
尽信书不如无书
一直以来我们都是对老师对前辈听之任之,对于教科书也仿佛神物一般的崇拜。幸好,我们的教科书来得多不足甚至误判的地方。量化只是其中都小小的一部分,我希望大家都可不该在虚心自学的同时,要有怀疑一切的消极。这样我们才会不断的去揭示推断出,我们才能自学到更多,才能进步!
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